Staphylococcus haemolyticus er gramm-jákvætt storku-neikvæð baktería sem er mjög algeng á sjúkrahúsum. Undanfarin ár hafa sýkingar afleiddir á sjúkrahúsum fengið aukna athygli vegna meiri áhættu þeirra. Staphylococcus haemolyticus getur enn frekar valdið húðsýkingum, heilahimnubólgu, kviðbólgu og jafnvel blóðsýkingu. Tafir á klínískri greiningu geta leitt til versnandi heilsufars, svo hröð greining á S. blóðsykur er lykillinn að nákvæmri meðferð.
Rannsóknarteymi kennarans Ji Tuo frá aðal rannsóknarstofudeild annars People's Hospital í Lianyungang, Kína birti grein „Hröð og sjónræn uppgötvun Staphylococcus hemolyticus í klínískum sýnum með Mira-LFS„ í tímaritinu „Analytica chimica Acta“, með áhrifaríkið 6,2.
1. Rannsóknar yfirlit
Í þessari rannsókn var komið á Mira-LFS aðferð sem byggð var á MVAA geninu til að greina Staphylococcus hemolyticus. Multi-ensím isothermal hröð kjarnsýru magnunartækni Mira var sameinuð með hliðarstreymisprófun LF til að ná skjótum greiningum á sjúkdómsvaldandi.
Tilraunin var gerð við 37 gráðu og hægt var að greina niðurstöðurnar innan 9 mínútna. Greiningarnæmið var 0. 147cfu/viðbrögð.
Mira-LFS uppgötvunaraðferðin er hentugur til að greina fastan punkt á Staphylococcus hemolyticus í klínískum sýnum, að átta sig á POCT aðferðinni til að bera kennsl á Staphylococcus hemolyticus, sem er mikils virði fyrir skjótan sjúkdómsgreiningu og meðferð á svæðum með undirskildri læknisþjónustu.
Rannsóknarteymið notaði Mira-LFS, QPCR og hefðbundnar bakteríuræktaraðferðir til að greina 95 handahófskennd klínísk sýni og staðfestu klínískt notagildi.
2. Rannsóknaraðferðir
Skematísk skýringarmynd af uppgötvun Mira-LFS er sýnd hér að ofan.
Rannsóknirnar notuðu DNA Isothermal Amp-Future Biotech Rapid Rapid Amplification Kit (Colloidal Gold Test Type) og kjarnsýrugreiningarprófun.
MVAA genalengdin er 30-35 kirni og lengd magnunar vöru er 100-350 bp. Alls voru 6 pör af frambjóðendum grunnar. Mira greining var framkvæmd með því að nota gDNA af stöðluðum Staphylococcus hemolyticus stofnum, frambjóðendur voru sýndir og magnunarafurðir voru sýndar með 2% agarósagel rafskoðun.
Hannaðu síðan rannsakann út frá framsigri grunnröðinni (lengir 16 bp afturábak). 5 'enda rannsakandans var merktur með FITC og 3' endinn var merktur með C3 hindrunum. Notaðu THF til að skipta um 31 núkleótíð í rannsaka. THF er 30 bp frá 5 'endanum og 15 bp frá 3' endanum. 5 'endinn á völdum öfugum grunnur er merktur með biotin.
Ennfremur fínstillti rannsóknarhópurinn viðbragðsskilyrði fyrir Mira-LFS uppgötvun Staphylococcus hemolyticus. Prófaðu með 37 gráðu með 2 mínútur frá 4 til 12 mínútur. Niðurstöðurnar eru sýndar á 8 mínútna viðbragðstíma og prófunarlínan er greinilega sýnileg. Að auki eru prófanir gerðar með 5 gráðu millibili frá {7}} gráðu. 37-42 gráðu er heppilegasti hitastigið fyrir Mira-LFS uppgötvun. Þess vegna er ákjósanlegur viðbragðstími og hitastig Mira-LFS aðferðarinnar fyrir stafýlókokka blóðmolýticus 8 mín og 37 gráðu, í sömu röð. Saman með lokaniðurstöðuna sem LFS er sjón innan 1 mínútu er heildar uppgötvunartíminn 9 mínútur.
3. Upplýsingar um niðurstöður
Sannprófun næmni
Mira-lfs greining var framkvæmd á mismunandi styrk erfðafræðilegs DNA (gDNA) sem fengin var úr raðþynnum Staphylococcus haemolyticus Cultures (1 0^6-10^0 CFU/ml).
Aðhvarfsgreining á líkindum eininga sýndi að 95% LOD ákvarðað með Mira-LFS prófinu var 0. 147 CFU/viðbrögð.
Staðfesting sértækni
Með því að greina 18 algengar sjúkdómsvaldandi örverustofnar og 15 klínískar stafýlókokkar blóðsykursstofnanir, var ákvarðað sértækni Mira-LFS uppgötvunar Staphylococcus blóðmýkjamis. Niðurstöðurnar sýndu að Mira-LFS prófið var neikvætt fyrir 18 aðrar sjúkdómsvaldandi bakteríur og jákvæðar fyrir 15 staðfest klínísk sýni af Staphylococcus blóðsykur.
Mira-LFS uppgötvun er mjög sértæk og hentar til skimunar á stafýlókokkus hemolyticus.
Raunveruleg sýnisprófun
Lianyungang Second People's Hospital safnaði af handahófi 95 sýnum, þar á meðal 35 húð- og mjúkvefsýni, 16 þvagsýni, 14 hráka sýni og 30 blóðsýni.
Niðurstöðurnar sýndu að uppgötvunaraðferðin var 100% í samræmi við QPCR aðferðina. Að auki, samanborið við gullstaðalinn (GB/T4789. 11-2003), var næmi og sértæki Mira-LFS uppgötvunaraðferðarinnar til að bera kennsl á Staphylococcus hemolyticus sýkingu 100% og 98,73%, í sömu röð. Þessar niðurstöður staðfestu enn frekar tæknilega hagkvæmni þessarar aðferðar við að greina Staphylococcus hemolyticus í klínískum sýnum.
Mira-LFS aðferðin er notuð til að greina POCT uppgötvun stafýlókokka hemolyticus. Það er skilvirkt, nákvæmt, einfalt og lágmarkskostnaður og hjálpar til við að taka skjótar ákvarðanir um greiningu og meðferð.
Lærðu um Mira tækni
Marg-ensím Amp-Future, hröð kjarnsýru mögnun tækni magnar kjarnsýrur við stöðugt hitastig 39 gráðu -42 gráðu, með viðbragðstíma aðeins 5-20 mínútur. Að auki er ekki krafist strangra rannsóknarstofuaðstæðna og umsóknarsvið eru fjölbreytt: Almennar rannsóknarstofudeildir á sjúkrahúsum, aðalmeðferð, heimapróf, reitir osfrv.
Hvarfefni vöruform eru fjölbreytt: frystþurrkað duft, frystþurrkuð örkúlur osfrv.; Niðurstöður sýna eru fjölbreyttar: rafskaut, flúrljómun, kolloidal gullprófunarstrimlar osfrv. Hvarfefnið hefur stöðugan afköst, er auðvelt í notkun og er þægilegt til geymslu og flutninga.
Með Mira sem kjarnavettvangstækni hefur það þróað röð stuðningsafurða eins og „öfgafullt kjarnsýruútgáfu tækni“, „tvískiptur rásar flúrljómunarskynjari“, „samþætt að fullu sjálfvirkt lokað uppgötvunarkerfi“, „Sjálfprófun kjarnsýru uppgötvunarbúnaðar“ o.fl.