Aeromonas hydrophila er veruleg sjúkdómsvaldandi baktería í fiskeldi, sem veldur alvarlegum sjúkdómum í eldisdýrum og hefur í för með sér verulegt efnahagslegt tap. Til að virkja hraða-uppgötvun á staðnum þróuðum við flytjanlegan örfljótandi vettvang sem samþættir fjöl-ensím ísóvarma hraðmögnun (MIRA) með sjálfvirkri vökvameðferð. Flíshönnunin innihélt smá titringsmótor og keramikhitapúða til að viðhalda
nákvæma hitastýringu og tryggja einsleitni hvarfsins í gegnum kjarnsýruútdrátt og mögnun. Lítil loftdæla rak hráa DNA útdrættinn í gegnum flísina í einu pípuþrepi fyrir nákvæmnimagngreiningu. Útdregið DNA var síðan flutt í hvarfhólf sem var fyrirfram hlaðið með MIRAhvarfefni fyrir jafnhita mögnun við 39 gráður undir rauntíma-flúrljómunarvöktun. Þessi vettvangur uppgötvaði
A. hydrophila í vatnssýnum innan 40 mínútna, sem nær línulegu bili frá 1 × 10² til 1 × 10⁷ CFU⋅mL−1og greiningarmörk (LOD) 10 CFU⋅mL−1. Sérstaklega gerir mátahönnun þess auðvelt að skipta á grunni og rannsaka, sem gerir vettvang auðveldlega aðlögunarhæfan til að greina fjölbreytta bakteríusýkla í fiskeldi.

Skematískur samanburður á flytjanlega örflæðispallinum og hefðbundnum greiningarvettvangi fyrir A. hydrophila. (A) Færanlegi örvökvi
pallur. Uppgötvunarverkflæðið á þessum vettvangi samþættir kjarnsýruútdrátt, nákvæma pípulagningu, mögnun og uppgötvun. (B) Hefðbundinn uppgötvunarvettvangur. Hefðbundið -vinnuflæði sem byggir á rannsóknarstofu byggir á háþróuðum búnaði, þjálfuðu starfsfólki og tímafrekum-ferlum.

Stöðugleikamat á flytjanlegum örflæðispalli. (A) Ljósmynd af flytjanlega örflæðispallinum. (B, C) Hitaafköst kjarnsýruútdráttar- og greiningarhólfa. Tengsl milli keramikhitapúða og hitastigs í hólfinu. (D) Stöðugleiki flúrljómunargreiningar (N=3). Flúrljómunarstyrkur var mældur með 5 mínútna millibili í gegnum mögnunarferlið.

Árangursmat á flytjanlegum örflæðisvettvangi. (A) Kvörðunarferill fyrir greiningu A. hydrophila (N=3). Kvörðunarferill var stofnaður með því að greina A. hydrophila á styrkleikabilinu 1 × 101 –1 × 108 CFU⋅mL−1við bestu aðstæður. (B) Flögu-til-afritunarhæfni mats. MIRA-greiningin fyrir A. hydrophila var gerð á tíu flögum sem voru framleidd úr hvoru tveggja óháðra móta. (C) Sérhæfnigreining (N=3). Sérhæfni MIRA-greiningarinnar var staðfest gegn marki A. hydrophila og 11 tegundum sem ekki{10}}markbakteríur. (D) Samanburður við qPCR (N=3). Bæði pallurinn og qPCR voru notuð til að greina A. hydrophila í ýmsum styrkjum. (E) Greining á akri-einangruðum stofnum (N=3). Fjórir akur-einangraðir stofnar af A. hydrophila fundust með því að nota bæði pallinn og qPCR.




