RPA-CRISPR/Cas12a kerfið í þessari rannsókn nær hraðri (30–40 mín), ofur-næmri (1 eintak/μL) HCMV uppgötvun með því að miða á snemmt-tjáða UL123 genið, sem gengur betur en hefðbundnar aðferðir við klínískar sýnatökuprófanir. Þessi nýjung á{9}sýkingu með litlum{0}álagi gerir{9}mögu sérstaklega hjá ónæmisbældum sjúklingum og undirstrikar hagkvæmni CRISPR-greininga til að bæta stjórnun á HCMV-tengdum sjúkdómum. Einfaldleiki og skilvirkni greinarinnar varpar ljósi á möguleika hennar sem-aðstoðartæki fyrir-takmarkaðar stillingar.
Mynstur RPA mögnunarstaða og val setts.
(A) RPA grunnhönnun varðandi staðsetningu mögnunarbrota. Örvar gefa til kynna grunnstöður frá upphafi til enda mögnuðu brotsins með P1-P6 frumunum.
(B) Agarósa gel rafdrættismyndin af RPA vörunni mögnuð upp með 6 HCMV grunnsettum.
(C) Skimun á mögnunarvirkni RPA setta frá mismunandi fyrirtækjum. P: Grunnur, NC: Neikvæð stjórn.
Niðurstöðurnar bentu til þess að AmpFuture settið sýndi mesta mögnunarvirkni.
Samanburður á jákvæðu hlutfalli MIRA-CRISPR/Cas12a, PCR - Fluorescent Probe Method og qPCR í klínískum sýnum.
Við söfnuðum blóð- og þvagsýnum frá 48 klínískum sjúklingum. Erfðafræðilegt DNA var dregið úr þessum sýnum með því að nota TIANamp Genomic DNA Kit, og niðurstöður UL122 uppgötvunar voru greindar með PCR-flúrljómunarprófunaraðferðinni. Þegar niðurstöður okkar voru bornar saman við klínískar greiningar, greindu aðferðir okkar 6 jákvæð sýni sem voru neikvæð í klínískum prófum.
